新生儿溶血病是指因母婴血型不合而引起的同族免疫性溶血，使胎儿在宫内或生后发生大量红血球破坏，出现一系列溶血性贫血、*疸以及其它多种临床表现的疾病。在我国以ABO血型不合者占多数，Rh血型不合者较少，其他如MN、Kell血型系统等罕见。实验室诊断除了常规ABO、Rh定型、胆红素测定外，确诊主要依靠“三板斧”（检验医学上称为“三项试验”）。
第一板斧是患儿红细胞直接抗人球蛋白试验，简称直抗。从患儿红细胞上直接查到了被吸附的抗体，证明红细胞已经受累。本试验阳性说明患儿红细胞已被血型抗体致敏，是诊断新生儿溶血病的有力证据。
第二板斧是患儿血清中游离抗体测定，简称游离试验。血清中存在与患婴红细胞上抗原相对应的游离抗体，则新生儿可能患溶血症。例如在A型的新生儿血清中检测到了IgG抗A，则该新生儿可能患有新生儿溶血病。如果是Rh血型不合，用母亲的血清代替患儿血清进行游离抗体测定，阳性检出率将大大提高。本试验阳性表明婴儿可能受害。
第三板斧是患儿红细胞抗体放散试验，简称释放试验。从红细胞上释放了具有血型特异性的抗体：①用热释放法检查AB0血型不合婴儿的红细胞是否释放了抗A、抗B、抗AB抗体或AB0血型系统以外的抗体；②用乙醚释放法检查Rh血型不合的婴儿红细胞是否释放了抗D、抗C或抗E抗体。本试验敏感性高，准确性好，即使直接和游离试验阴性，放散试验也可能阳性。是新生儿溶血病的直接证据，也是“三项试验”中最敏感的指标。
一般情况下，只需上述“三板斧”就能搞定，诊断出有无新生儿溶血病。所以，妇女怀孕时要查丈夫的血型，当夫妻血型不合（特别是妻子为O型，丈夫为A型、B型、AB型或妻子为Rh阴性，丈夫为Rh阳性）时，母亲与婴儿的血型也可能不合，母亲与婴儿血型不合就可能发生新生儿溶血病，虽然发生率很低（约为1/），但也不得不防。新生儿出生后出现相应的溶血病症状，要立即抽血做血型检查及“三项试验”，以便早发现、早诊断、早治疗。
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