该篇文章通过全外显子组测序研究，在天性淋巴管发育不良引起的持续性淋巴水肿影响的兄弟姐妹中鉴定PIEZO1（一种导致早期截短的剪接变体和一种非同义错义变体）的双等位基因突变。对患者红细胞的分析以及异源系统的研究表明受影响的等位基因中PIEZO1功能大大减弱。该研究成果描绘了一种新的临床类别的PIEZO1相关遗传性淋巴水肿。
研究背景Piezo1离子通道是包括血管内皮细胞、肾小管细胞和红细胞等几个细胞中机械应力的介质。Piezo1功能性获得突变引起常染色体显性溶血性贫血--脱水遗传性口形红细胞增多症。然而，Piezo1功能性缺失突变对表型的影响仍未知。
材料方法实验材料为健康的父母本和一对患病的子代（Fig.1a-d）。全外显子测序来研究该家族中Piezo1功能性缺失突变对表型的影响，同时通过sanger测序和细胞模型来进一步验证结论的可靠性。
研究发现通过全外显子测序发现在千人基因组数据（Genomesprojects）中MAF0.1%的候选基因是Piezo1，受影响的子代中均发生了混合杂合突变，一个剪切突变(c.+1GA)和一个错义突变（c.GC;pGlyArg）,并且发现，这种突变不存在于现已研究的千人基因组数据（Genomesprojects）中，c.+1GA突变来自于亲本I1（Fig.1e），c.GC突变来自于亲本I2（Fig.1e）.通过RT-PCR和sanger测序验证了在家系中所有携带c.+1GA剪切突变的个体存在内含子插入（Fig.1f-k）。
在负压刺激条件下亲本和正常志愿者的红细胞可呈现强健的钙离子通道(Fig.2a–c,e,f)，这一点之前在红细胞中Piezo1蛋白可正常表达的小鼠中也出现了这种现象。在相同的刺激条件下，压力引诱的钙离子通道的响应机制没有在II.2(Fig.2e,f)呈现出来。
为了进一步研究错义突变（p.GR）对Piezo1蛋白的表达影响，作者又构建了Piezo1功能缺失的HEKT细胞系（HEK-PIKO），与野生型相比，和II2相似的HEK-PIKO中红细胞钙离子响应机制受损（Fig.3a），PIEZO1-GR通路形态跟野生型一样(Fig.3b–d)，但是降低了平均阳极电流密度(Fig.3d)；研究剪切突变（c.+1GA）对Piezo1蛋白的表达影响，作者又分别在野生型和p.GRPIEZO1型的氨基酸的位插入了一个myc标签，其中野生型中81.5%的转染细胞被标记为myc抗体。在同样的实验中，P1-GR-eMYC通道显示细胞表面标记减少，只有17.2%的转染细胞显示可识别的膜标记（Fig.3a），综上表明错义突变影响了Piezo1蛋白的膜表达而剪切突变影响了Piezo1蛋白的完整表达，使其过早的终止了表达。
讨论与结论我们的研究表明PIEZO1的功能性缺失可以作为一个引起先天性淋巴管发育不良的新基因型。之前有研究表明在小鼠中，PIEZO1的缺失导致了胚胎的死亡，而在人的个体中PIEZO1的缺失导致了较轻的病理性状；这种病理性状的不同可能跟物种有直接关联也可能是部分的蛋白功能保证了血管发育。小鼠淋巴内皮细胞中发现的PIEZOL的特定缺失，对于组织发展过程的致病机理研究有重要意义。更有价值的是，临床病人PIE01的功能验证，可作为未来临床研究中的诊断或筛选工具。
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