遗传性溶血性贫血

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TUhjnbcbe - 2020/12/2 15:39:00
脸上白癜风 http://m.39.net/pf/a_4530985.html
ReginaHofmann-LehmannandKatrinHartmannJournalofFelineMedicineandSurgery(00),81–86摘要实用意义:猫白血病病*(Felineleukaemiavirus,FeLV)是世界范围内发生于家猫和小野猫的一种逆转录病*。缺乏强FeLV特异性免疫力并进行性感染的猫通常会发展成致命的FeLV相关疾病。FeLV感染发病机理的许多方面已被阐明,其中一些是在最近几年中使用分子技术进行的。建议了解每只猫的FeLV状态,因为FeLV感染会影响每只患病猫的预后和临床管理。此外,了解猫的FeLV状态对于预防感染的进一步传播具有流行病学意义。临床挑战:由于感染的结果不同,诊断FeLV感染仍然具有挑战性,感染结果可能随着时间的推移而变化,这取决于病*和宿主免疫系统之间的平衡。此外,FeLV感染的检测在过去几年里变得越来越精细,现在包括对不同病*和免疫参数的诊断分析。对FeLV感染的发病机理的了解以及对FeLV检测方法的了解,是正确解读任何检测结果和准确确定猫的FeLV状态的重要前提。目的:本篇综述介绍了有关FeLV发病机制、FeLV感染需要确定的主要特征、常用的FeLV检测方法及其特点和解释的最新知识。欧洲猫病顾问委员会(EuropeanAdvisoryBoardonCatDiseases)开发了一种诊断猫FeLV感染的算法,并讨论了在特定情况下FeLV的检测。除了提高对家猫的这种致命感染的认识外,其目的还在于提供诊断专业知识,以使兽医在实践中提高他们对FeLV感染的认识,并进一步降低其感染率。关键词:FeLV,逆转录病*,诊断试验,发病机制,感染结果,抗原,抗体,ELISA,PCR,RT-PCR,病*脱落,血清学猫白血病病*–仍是一个谜猫白血病病*(Felineleukaemiavirus,FeLV)是一种众所周知的病原体,广泛存在于家养和小型野猫中。它是一种γ-逆转录病*,50多年前由Jarrett等人首次描述为“与白血病(淋巴肉瘤)相关的病*样颗粒”。FeLV感染可导致疾病进展的猫出现免疫缺陷、血细胞减少和瘤形成。使用日益健全和准确的诊断检测以识别FeLV感染的猫,以及开发有效的FeLV疫苗的发展,已导致许多地区的家猫FeLV感染的发病率降低,尽管最近有报告称FeLV患病率下降停滞。如果未及时发现,FeLV感染可能会迅速传播,尤其是在幼年的多猫环境中。这篇综述总结了与临床相关的最新进展,特别是在诊断以及对感染发病机理的理解上。FeLV暴露和感染结果与所有逆转录病*一样,FeLV是一种包膜RNA病*。它携带一种酶(逆转录酶),该酶将病*RNA基因组逆转录为DNA形式,然后通过另一种酶(整合酶)作为前病*整合到宿主的细胞基因组中。除了外源性FeLV,家猫体内还发现了几种内源性逆转录病*。它们存在于每只猫中,是宿主基因组的一部分。因此,它们由猫后代遗传,但通常不会自行形成传染性或致病性病*。从诊断的角度来看,重要的是要使用能够区分外源性FeLV和内源性FeLV样序列的FeLV检测。这对于分子测定尤其重要。FeLV大量分泌在唾液中,但在粪便、尿液和乳汁中也可发现。FeLV在环境中不稳定,因此,通常认为传播需要感染和未感染的猫之间亲密友好或积极的接触。间接接触唾液,或者在较小程度上,FeLV感染的猫粪便也足以传播感染(例如,经由食物碗或猫砂盆的共享)。此外,FeLV可以从感染母猫垂直传播到其小猫。FeLV感染通常始于口咽粘膜。随后,病*在邻近的扁桃体和局部淋巴结中复制。病*通过淋巴组织中受感染的淋巴细胞和单核细胞传播到全身(原发性/初级病*血症)。在骨髓中的复制涉及中性粒细胞和血小板前体的感染,导致继发性病*血症和全身感染的发生。所有年龄段的猫都可能感染FeLV。但是,进行性FeLV感染的易感性在一定程度上取决于年龄,与成年猫相比,小猫更容易发生进行性FeLV感染。成年猫也可逐渐感染FeLV。FeLV进行性感染ProgressiveFeLVinfection进行性感染的猫骨髓受累,导致继发性(和持续性)病*血症的发生,其中外周血中的粒细胞和血小板(以及淋巴细胞和单核细胞)被FeLV感染(图1)。进行性感染的特征在于病*血症持续/抗原血症和缺乏有效的FeLV特异性免疫应答。换言之,病*永远占上风(图)。猫进行性FeLV感染是临床和流行病学最重要的鉴别。这些猫会分泌大量的FeLV颗粒,并对其他猫构成感染风险。无论感染了FeLV的猫健康状况如何,都应将它们与未接触过FeLV的同伴分开隔离。

图1显示了猫接触白血病病*(FeLV)后的时间进程以及四种可能的FeLV感染结果(进行性Progressive、退行性Regressive、局灶性Focal[罕见]和顿挫性Abortive感染)。根据猫的FeLVp7抗原(红色)、FeLV前病*DNA(紫色)和中和抗体(nAb;绿色)状态来描绘。对于退行性感染,再激活的可能性(先前FeLVp7抗原阴性[aviraemic]的猫病*血症和病*脱落复发)随时间的推移而降低。?=死亡

图猫白血病病*(FeLV)感染的结果可以用一组平衡量表来考虑,一边是猫的免疫反应,另一边是病*。在顿挫性FeLV感染中,猫占上风(天平上的体重更多);在进行性FeLV感染中,病*占据上风。在退行性感染中,猫的免疫系统可以控制病*,因此尽管可能发生再激活(病*血症和病*脱落复发),但没有或仅有非常有限的病*复制发生。在局灶性感染(罕见)中,猫的免疫系统使病*复制被隔离在某些组织中。对于每个感染结果(顿挫性、退行性、局灶性和进行性感染),显示了抗FeLV免疫力(粉红色)、前病*整合(蓝色)、病*复制(绿色)和诱发FeLV相关疾病的可能性(灰色)。三个带有渐变颜色的方框表示正状态或负状态的可能性通常通过间隔数周或数月反复检测猫的抗原血症来确认进行性感染。只有重复的阳性抗原检测结果才能证实进行性感染的存在(图1)。值得注意的是,在一些猫中,最初的FeLV接触后,进行性FeLV感染状态可能需要数周才能发展(图;例如,猫6和11)和/或猫的p7抗原检测结果在阴性和阳性之间交替(以下称为“交替性”),尤其是在宿主-病*平衡达到稳定状态之前的早期感染期间(见图和图[猫6、7、8、11、1、1和15])。进行性感染的猫的预后比退行性FeLV感染的猫差(表1)。他们极有可能死于可能致命的FeLV相关疾病,有时甚至在短短几个月内(图)[cat1])。尽管如此,如果得到很好的照顾,许多进行性感染患猫也能继续过着健康快乐的生活许多年。图游离p7抗原和前病*导致的15例猫白血病病*(FeLV)感染,具有不同(在某些情况下为例外)的FeLV感染过程。所有猫都实验性地感染了同一病*株(FeLV-A/Glasgow-1)。并非在所有时间点都可获得全部结果:早期研究早于FeLV前病*PCR的引入,和长期随访并不适用于所有猫。在代表FeLV退行性感染的猫中,猫、、8、1、1和15经历过短暂病*血症。下面的框中描述了一些值得注意的结果。重复的p7抗原检测和前病*载量的定量分析可以帮助预测每只猫的最终FeLV感染结果。再激活是指先前FeLVp7抗原阴性(aviraemic)猫病*血症和病*脱落的复发

表1猫白血病病*(FeLV)感染的可能结果特征以及其定义的检测结果

退行性FeLV感染RegressiveFeLVinfection退行性感染(表1)的患猫已经产生了部分有效的抗病*免疫应答,并且已经从原发性病*血症中恢复过来(图)。大多数退行性感染的猫不经历骨髓感染(中性粒细胞和血小板前体感染),因此只有淋巴细胞和偶发的单核细胞呈前病*阳性,而在外周血细胞中通常无法检测到病*RNA。抗原血症的清除通常在1-1周内观察到;罕见的,可能需要数月时间(图,cat),尽管病*血症清除的可能性随时间推移而降低。偶尔,未遵循明确的FeLV感染过程的猫可能会观察到转归。这些猫中的一些可以在初始抗原血症期间呈阳性后暂时检测抗原阴性,后来随着进行性感染的建立而变为持久性阳性(图,猫6、7和11)。FeLV病*血症的清除取决于猫的免疫系统和病*之间的平衡(图),并可能受多因素影响,例如猫的年龄和免疫状况、同时存在的应激源、共感染、特定病*分离株和暴露水平。为了确定最初检出FeLV抗原阳性的猫是经历了退行性还是进行性FeLV感染,必须对FeLV抗原进行反复检测(退行性感染的猫检测将最终抗原阴性,而进行性感染的猫检测将继续抗原阳性)。尽管已经在一些患有退行性感染的猫中描述了淋巴瘤或骨髓抑制,但退行性感染的猫通常不会发展FeLV相关疾病。在FeLV感染后早期,通过实时PCR和实时RT-PCR检测,感染结果不同(即退行性感染与进行性感染)的猫之间的前病*和血浆病*RNA载量没有差异。因此,在FeLV暴露后的早期时间点,FeLV前病*或血浆病*RNA载量不能用于区分退行性感染和进行性感染的猫。但是,在暴露于FeLV后数周,与进行性感染的猫相比,退行性感染猫的前病*和血浆病*RNA含量较低。因此,一旦FeLV感染确定,就可以使用前病*和病*RNA载量来帮助区分进行性感染和退行性感染。在该领域中,由于通常无法确定自然感染FeLV的猫处于哪个阶段,因此仅在单个时间点的前病*和血浆病*RNA载量不足以确定该猫是进行性还是退行性感染。因此,建议在1-个月后进行重复检测以清楚地确定感染的过程。在退行性感染期间从抗原血症中恢复后,病*复制仍可能在数月内复原,并有可能长达数年,在大剂量糖皮质激素存在下培养骨髓细胞(检测潜伏期;注意,自从FeLV前病*PCR引入以来,通常不再进行骨髓培养)。在糖皮质激素的免疫抑制剂量下,病*重新激活(病*血症复发和病*脱落)的能力清楚地表明,这种病*只是被猫的免疫系统控制着,并没有被完全消灭。使用前病*PCR技术,可在退行性感染猫(FeLV前病*携带者)的外周血或骨髓中检测到FeLV前病*,而实时RT-PCR可能或可能无法检测到血浆病*RNA。由于暴露增加,重新激活的潜力随时间的延长而降低(图1),这也取决于宿主的免疫系统和病*之间的平衡(图)。在患有退行性感染的猫中,FeLV可以在体内重新激活,例如,如果该猫由于任何原因变得免疫功能低下。猫不再能抑制病*复制,抗原血/病*血症复发,猫会排出病*,并可发展成FeLV相关疾病。有证据表明,血浆病*RNA阳性的退行性感染猫比血浆病*RNA阴性的猫具有更高的病*再激活率。进行性感染的猫可能永远无法完全清除FeLV感染。但是,前病*载量可能非常低,并且可能(至少暂时)下降到检测限以下,具体取决于所用FeLV前病*PCR的灵敏度。顿挫性FeLV感染AbortiveFeLVinfection在前病*整合之前,有一类猫限制了FeLV感染。所有直接的FeLV检测方法均为阴性(FeLV抗原、前病*和病*检测),抗体反应是先前FeLV暴露的唯一标志(表1和图1))。直到最近,第一个常规的抗FeLV抗体检测才开始商业化。但是,有关该检测在临床条件下是否能可靠地检测出FeLV顿挫性感染的猫,目前尚无足够的数据。顿挫性感染的猫具有很强的抗FeLV免疫力(图),通常只会经历少量的FeLV暴露。各种感染的结果中,这是对猫最有利的——平衡向猫的倾斜(图)。猫只暴露于极少量的病*(例如,通过粪便间接传播)即可实验性地诱发猫的顿挫性感染。局灶(局部或非典型)FeLV感染Focal(localisedoratypical)FeLVinfection在某些猫中,血液中可以存在游离病*抗原(p7抗原阳性),而没有传染性病*(病*分离阴性)。这些猫在较早的研究中被描述为“非病*血症猫”。如果外周血中没有复制病*的抗原血症持续了数年,则可能是由所谓的局灶性(局部或非典型)FeLV感染引起的,猫的免疫系统将其病*复制保持在某些组织中,如脾脏、淋巴结、小肠、泌尿道或乳腺。在这些猫体内,游离FeLVp7抗原的产生和释放到血液中(但没有或仅有受感染细胞的最小释放与原病*整合)可能是间歇性或低*性的(表1)。猫局灶性FeLV感染罕见,可能不是主要的流行病学问题,但是这种感染结果可能导致FeLV感染出现令人困惑的表现,并使FeLV检测结果混乱。有一例母猫局灶性感染病例,病*被隔离在乳腺中。在血液中的游离FeLVp7抗原检测结果为阴性的阶段中,母猫通过乳汁将病*传播给了小猫。已报道在实验条件下与检测结果不一致的局灶性感染,并且也已在多达10%自然FeLV感染的猫中观察到。在一项研究中,大约有三分之一“非病*血症猫”FeLV检测结果都是前病*PCR阳性,并假定这些猫的骨髓受到感染。最后,有些猫在FeLV感染初期的检测结果可能不一致或交替(见方框)。FeLV感染的主要特征:抗原性猫,病*脱落者和前病*携带者从临床和流行病学的角度来看,首要任务是确定猫是否具有病*性/抗原性(即病*脱落)以及是否患有进行性或退行性感染(表1和图1)。近年来,可用于实现这些目标的方法已经发生了改变。抗原性猫多年来,抗原血症(血液、血浆或血清中存在游离的p7FeLV衣壳抗原)一直是FeLV感染最常用的标志物。在大多数猫中,抗原血症是病*血症的一种衡量指标(即,使用病*分离技术可在细胞培养物中检测到具有复制能力的病*)。但是,已经描述了一些“非病*血症”的有抗原性但无病*性的猫。正如讨论的那样,不一致的结果主要出现在FeLV感染的早期阶段(请参见第86页的方框),或者是局灶性FeLV感染(另请参见表1和以上)。病*血症的检测(通过病*分离)既费力又费时,并且只能在专业实验室进行(表)。相反,通过快速即时检测(POC)或在实验室中使用基于定量平板的ELISA可以很容易地检测抗原血症。检测游离FeLVp7抗原的POC检测基于ELISA,其他免疫色谱分析或快速免疫迁移分析,可从多家制造商处获得。其中一些检测应优先使用血清或血浆进行,因为某些研究中全血导致假阳性结果的发生率较高,特别是当样品溶血时。一些平板ELISA可以产生定量的抗原负荷或控制潜在的混杂因素,例如猫抗小鼠抗体。大多数POC检测的诊断性能良好,但取决于制造商和应用的国家,在其灵敏度和特异性略有不同。当前的p7抗原检测均不得用于唾液样本,因为这会遗漏一些被感染的猫。表猫白血病病*(FeLV)检测方法的详细信息

一些专业实验室提供RT-PCR检测病*RNA。例如,在被感染猫的唾液中。通过唾液中RT-PCR检测病*RNA通常与感染猫血液中抗原的检测密切相关。而送检专业实验室进行RT-PCR,费时费钱,但其好处是在FeLV暴露一周内,可检出唾液和血液中的FeLV病*RNA(即在血液中检出p7抗原之前至少周;表)。

FeLV脱落者/传播者

FeLV脱落者在流行病学上具有重要意义,因为它们会对未感染FeLV猫造成感染风险。任何进行性FeLV感染的猫和抗原阳性的退行性感染猫(即在退行性感染的早期或重新激活后)都应视为FeLV脱落者(图1)。

已经表明,抗原血症(血液中游离的FeLVp7抗原)与唾液中病*RNA的存在有着极好的一致性。因此,可以通过检测血液的FeLVp7抗原或通过RT-PCR检测唾液病*RNA,来检测FeLV脱落者;后一种检测较早呈阳性,因此在疑似非常早期感染期间可能对诊断有用(表)。

唾液取样和RT-PCR检测也可用于多猫环境,以确认群体中不存在FeLV脱落者。已证实,尽管由于稀释作用而导致测定灵敏度下降,但在多达0只病*阴性猫的唾液样本中,单个阳性猫仍将产生阳性RT-PCR结果。因此,自然条件下,建议最多收集10个样品。可以在某些专业实验室中进行样品合并(建议提前查询)。请注意,合并样本的检测不适用于已知感染了FeLV的猫家庭。

前病*携带者前病*携带者具有流行病学意义,因为如果将其用作献血者,可能会发生无意的FeLV传播。更一般而言,如果前病*DNA的复制能力不再受免疫系统控制,病*复制就会再次发生,这些猫将成为FeLV脱落者。FeLV前病*是使用DNA实时PCR检测到的,具有高度敏感性和特异性。发现使用DNA实时PCR检测外周血中的FeLV前病*比检测游离的FeLVp7抗原对猫的FeLV感染更为敏感。从全血中进行的DNAPCR检测到了所有FeLV前病*携带者,其中包括进行性感染和退行性感染的猫(图1)。但是,并非所有的前病*携带者都具有FeLVp7抗原阳性。退行性感染的猫通常是FeLV前病*阳性和抗原阴性的——例外的是在任何初始抗原阶段或重新激活时(图1)。在瑞士的一项早期研究中,根据FeLV前病*阳性和FeLV抗原阴性状态,发现有10%的宠物猫确定为退行性感染。此后的几项研究证实了全世界不同猫群中存在退行性病*感染FeLV的猫(即前病*阳性,游离p7抗原阴性)。血液前病*PCR在FeLV暴露后比p7蛋白抗原检测更快地产生阳性检测结果(表)。在实验研究中,猫在FeLV暴露后1-周(p7抗原为-6周)为前病*阳性。FeLV检测方法以下讨论集中于检测游离FeLVp7抗原、病*RNA和前病*DNA的最常用方法。还讨论了FeLV抗体的检测,因为最近在欧洲已经可以使用POC抗FeLV抗体检测。其他方法可在专业实验室中使用,例如病*分离或免疫荧光测定(表),但不再常用,因此不再讨论。血液游离FeLVp7抗原检测何时检测应该知道每只猫的FeLV状态,而p7抗原检测是实现这一目标的最常用方法。尤其应在以下猫或场景中进行检测:v因任何原因怀疑感染FeLV的猫;v去接受兽医检查的病猫;vFeLV疫苗接种前的健康猫;vFeLV病史未知的猫;v用于检测FeLV脱落者,例如在多猫环境中;v在将一只新猫引入环境之前。如何解释一个单一的阳性结果任何阳性或可疑的p7抗原检测结果(例如,只有在制造商指示的检测读数时间过去后才为弱阳性或阳性)应立即确认,特别是如果FeLV患病率低或预期的FeLV暴露风险低的猫。随着患病率的降低,阳性结果的预测值会降低,这意味着即使使用最准确的抗原检测,假阳性检测结果的比率也会增加。可以通过应用第二种(最好是不同的)p7抗原检测(即来自其他制造商的POC检测或实验室中的定量ELISA)来进行确认。或者,可以将唾液样品送检进行RT-PCR检测唾液中的病*RNA,或将EDTA血液样品送检进行前病*PCR检测。如上所述,抗原阳性猫通常也是前病*阳性(罕见的例外参见局灶性感染部分)。为安全起见,由于FeLV抗原血症与FeLV脱落有关,因此对游离p7抗原呈阳性结果的猫(即使有疑问或尚未确认阳性)应与FeLV阴性同伴隔离,直到确认没有感染为止。如何解释确认的抗原阳性结果如果确认游离p7抗原的阳性结果,则表明该猫具有抗原性,并且在检测时是FeLV脱落者。应在6周后对动物进行重新检测,如果6周后再次检测仍阳性,则确定该动物是否已进行性感染为持续性抗原血症/病*血症,或是否已退行性感染为短暂性抗原血症/病*血症。抗原性猫具有感染风险,无论其健康状况如何,都应与FeLV阴性同伴保持隔离,直到以后再检测阴性。如果情况允许将猫与其他猫分开,确认的FeLV抗原检测阳性结果(无论是单个结果还是一段时间内反复出现阳性结果)不应成为猫的死亡判决。如何解释阴性结果游离FeLVp7抗原的阴性检测结果是高度可靠的,因为在大多数国家,由于FeLV流行率较低,阴性结果的预测值比阳性检测结果的预测值高得多。这意味着猫在检测时没有抗原性。因此,这只猫未曾暴露于FeLV(未感染)、对FeLV免疫(例如已接种疫苗)、克服了抗原血症(退行性感染)、FeLV顿挫性感染,或因为它仍处于FeLV感染非常早期阶段而尚未呈阳性。FeLV暴露后通常需要至少–6周(有时甚至更长),才能在感染猫的外周血中检测到FeLV抗原。如果不能绝对排除最近的FeLV暴露,则应在大约6周内对猫进行重新检测。在重新检测之前,猫应与其他猫保持隔离(例如,隔离在动物收容所中;宠物猫无室外通道)。这是为了不给其它猫带来风险,也不会在6周之内感染病*;由于未知的FeLV暴露,后者将导致需要进一步重新检测。通过RT-PCR检测唾液(单只或多只猫)中的病*RNA何时检测p7抗原阳性的猫通常唾液FeLV病*RNA也呈阳性。因此,通过唾液RT-PCR检测FeLVRNA可作为抗原血症的标志物,进行RT-PCR的适应症与针对游离FeLVp7抗原检测所讨论的适应症相同。但是,考虑到RT-PCR的相对较高的成本和检测的周转时间(通常为1-天),该检测通常不用于个别猫。一个例外可能是唾液收集绕开了与血液收集相关的问题(例如,易怒猫或没有现场兽医资源的收容所中)。另一个例外可能是在血液中FeLVp7抗原检测结果呈阳性或可疑之后,将RT-PCR用作确认检测。此外,在FeLV感染的非常早期阶段,唾液RT-PCR可能是有用的,因为唾液中的病*RNA(甚至在血液中更是如此)比在血液中可检测到p7抗原早约周可检测到。实时RT-PCR检测的另一个应用是检测唾液样本中FeLV病*RNA的存在,因为其极高的敏感性和唾液中非常高的FeLV病*载量。实时唾液样本的实时RT-PCR是一种经济高效的筛选分析方法,用于在可能没有FeLV的多猫环境中确认不存在FeLV脱落者(参见关于FeLV脱落者的讨论)。如何解释RT-PCR阳性结果如果单只猫唾液FeLVRT-PCR结果为阳性,则说明该猫具有抗原性,并且在检测时是FeLV脱落者。因此,其解释与对游离FeLVp7抗原呈阳性的猫的解释相同。应在6周后对猫进行重新检测,如果6周后再次检测仍阳性,则确定它是进行性还是退行性感染。FeLV脱落猫应始终与FeLV阴性同伴保持隔离,无论它们的健康状况如何,直到重新检测为阴性。如果合并的唾液样本(种群分析)呈阳性,则需要对单个猫进行后续检测,以通过对单个唾液拭子进行RT-PCR或检测个体猫血液FeLVp7抗原来检测测试猫组中的FeLV脱落猫。实验室污染可能导致RT-PCR假阳性。重要的是仅使用灵敏度和特异性是已知的参考实验室进行RT-PCR测定,并进行提取对照以及阴性和阳性PCR对照。如何解释阴性结果如果单只猫的唾液FeLVRT-PCR结果阴性,则在检测时该猫没有抗原性。因此,可能是猫没有接触FeLV(未感染)、对FeLV免疫(例如已接种疫苗)、克服了抗原血症(已退行性感染)、FeLV顿挫性感染或因仍处于FeLV感染初期尚未呈阳性。唾液RT-PCR(血液RT-PCR)暴露后的阴性期明显短于血液p7抗原检测。FeLV暴露后通常至少需要~6周(有时甚至更长),才可以在感染猫的外周血中检测到FeLV抗原,而早在FeLV感染后1周之内就可以检测到唾液(和血液)中的病*RNA。血液中的FeLV前病*的检测何时检测FeLV前病*DNAPCR可用于以下猫和场景:v作为阳性或可疑的游离p7抗原检测结果的确认性检测;v检测前病*携带者/退行性FeLV感染的猫;v在潜在暴露后的较早时间点进行检测(前病*PCR早于p7抗原检测呈阳性);v确认多猫种群中不存在FeLV前病*携带者;v澄清疑似FeLV感染但无FeLV抗原血症的模糊临床病例;v在输血前检测献血者和血液制品。如何解释阳性结果如果FeLV前病*PCR结果为阳性,则表明该猫已暴露于FeLV并已发展为进行性或退行性感染(图1)。一些实验室还提供前病*载量。如果前病*载量高(低循环阈值),则在检测时猫很可能具有抗原性。如果前病*载量持续保持高水平,则猫可能会进行性感染。如果FeLV前病*PCR结果为阳性,则检测抗原血症,以区分进行性感染和退行性感染。感染几周后,血液前病*载量也可用于区分进行性和退行性感染的猫。但是,在自然感染的猫中,感染的时间点通常是未知的,在感染早期,退行性感染和进行性感染的猫前病*载量没有差异。实验室污染可能导致PCR假阳性结果。重要的是仅使用灵敏度和特异性是已知的参考实验室进行RT-PCR测定,并进行提取对照以及阴性和阳性PCR对照。如何解释阴性结果如果FeLV前病*PCR结果为阴性,则该猫没有将前病*整合到其基因组中,也不会发生进行性或退行性感染。因此,这只猫或多或少都没有接触过FeLV,也没有发生局灶性或顿挫性感染,或者处于感染的初期。但是,猫暴露于FeLV后通常只需要1-周即可成为FeLV前病*阳性,因此在这短时间内感染的可能性很小。抗FeLV抗体的检测何时检测暴露于FeLV的猫可对病*产生不同程度的免疫反应(图)。而细胞免疫应答难以确定,即使是在专业实验室,也有几种方法来确定抗FeLV抗体,包括中和试验和一种新颖的POC试验。为了确定针对FeLV的真正体液免疫力,必须对具有生物活性的病*中和抗体进行定量。但是,病*中和只能在专业实验室中进行,并且需要耗时的细胞培养测定。在顿挫性FeLV感染猫中,抗体是暴露于FeLV的唯一指标(图1和)。因此,检测FeLV抗体是检测顿挫性感染猫的唯一方法。但是,顿挫性感染猫不会脱落病*,不会出现临床体征,也不会重新激活感染,因此它们的临床和流行病学相关性非常低。FeLV中和抗体的检测可用于帮助表征疾病结果(即进行性感染与退行性感染)。大多数具有退行性感染的猫表现出强烈的体液免疫应答和高水平的中和抗体,而进行性感染的猫通常具有低水平或不具有针对FeLV的中和抗体(图)。目前的FeLV疫苗都没有一种能诱导以中和抗体表现出来的反应。这些疫苗可能会刺激细胞免疫,从而预防攻*。检查不同的FeLV抗原以评估其在开发抗FeLV抗体POC检测中的诊断效用,已确定FeLVp15E(包膜跨膜蛋白)的重组制剂是最有希望的抗原。在自然感染的猫中,与前病*PCR结果相比,p15EELISA的诊断敏感性为77.1%、特异性为85.6%。将该抗原用于FeLV抗体检测(与FeLVp7抗原检测结合使用)可能为识别所有暴露于FeLV的猫提供最大的希望。预期抗体在患有退行性或顿挫性感染的猫中呈阳性反应,而抗原检测将识别所有进行性感染的猫。目前尚不清楚抗p15E抗体的存在与FeLV感染保护的相关性如何,以及是否顿挫性感染的猫抗体终生存在。这些重要问题仍然需要回答,以确定顿挫性感染的猫是否可能对新感染免疫,因此不需要接种疫苗。在FeLV疫苗接种的猫中,用p15E抗原进行抗体检测的结果取决于所用疫苗。用全病*疫苗接种的猫可能会产生强大的抗p15E抗体,但是当使用重组蛋白或基于金丝雀痘的疫苗时,情况可能并非如此。如何解释阳性结果目前不常规使用FeLV抗体检测(表)。最近在欧洲市场上引入了检测针对FeLVp15E抗原的抗体POC测试。但是,目前没有足够的数据来评估该检测在自然感染FeLV的诊断价值。必须进行对照研究才能确定该检测能否可靠地预测FeLV感染或针对FeLV的免疫力,以及是否可以将其用作疫苗接种前的检测。如何解释阴性结果大多数没有FeLVp15E抗体的猫以前可能不会接触过FeLV。但由于并非所有暴露于FeLV的猫都能维持抗FeLV抗体,因此在缺乏FeLV抗原的情况下抗体检测阴性的结果并不排除先前有FeLV暴露。特定情况下FeLV检测单只猫FeLV检测欧洲猫病顾问委员会(AdvisoryBoardonCatDiseases,ABCD)创建了一种诊断方法(“ABCDFeLV诊断工具”),旨在引导兽医从业人员通过以下步骤来确定猫是否暴露于FeLV的可能性以及患猫是否经历了进行性或退行性性感染。这些诊断步骤显示在下面的框中。该诊断工具基于风险评估以及猫的临床表现,考虑了不同的检测特征,检测产生阳性结果的时间跨度以及检测的阳性和阴性预测价值。它还强调了确认结果以及重复检测以确定FeLV感染不同过程的步骤。有关使用ABCDFeLV诊断工具的更多信息,请访问abcdcatsvets.org.图欧洲猫病顾问委员会(ABCD)猫白血病病*(FeLV)诊断工具。应遵循该诊断方法以确定猫是否感染FeLV以及最有可能的感染结果。*有关与FeLV相关的危险因素或临床疾病,请参阅下方框。?无论何时在该方法的任何步骤中建议检测血液样本中的游离FeLVp7抗原(即时检验[POC],平板ELISA),对唾液样本中的病*RNA(RT-PCR)进行检测也可以使用。?在极少数情况下,局灶性FeLV感染可能是血液样本中游离p7抗原阳性和前病*PCR阴性的原因。§在临床怀疑FeLV感染和阳性游离p7抗原检测的猫中,确认性检测并非绝对必要,因为这些猫不太可能出现假阳性检测;阳性预测值很高,因为猫已经在FeLV感染的高风险组中。该诊断算法基于“ABCDFeLV诊断工具”,该工具可在abcdcatsvets.org获得。献血者的检测已经证明,退行性感染的猫可以通过输血将FeLV传播给未感染受血者。一些接受退行性感染猫血液的猫随后发展为进行性FeLV感染和FeLV相关疾病(非再生性贫血和淋巴瘤)。已经输血的血液检测游离FeLVp7抗原呈阴性,病*分离呈阴性,但FeLV前病*DNA呈阳性。因此,检测游离的FeLVp7抗原的方法不足以防止FeLV感染的无意传播。建议使用实时荧光定量PCR检测任何作为献血猫的FeLV前病*,以排除FeLV向受血者的无意传播,并且更普遍的是进一步降低猫群中FeLV感染的患病率。检测以防止将病*引入无FeLV猫群如果来自未知环境的猫(例如,救助猫)或具有未知FeLV暴露史的猫(例如,具有室外通道的猫或来自并非所有猫都经过检测或某些猫具有室外通道设施中的猫)被引入未感染FeLV的猫群,例如繁殖场所或宠物猫家庭,则应在引入前对待引入猫进行FeLV抗原血症和/或脱落的检测。为此,可以遵循ABCDFeLV诊断方法(图)。重要的是,在整个检测期间(包括可能的重新检测),隔离待引入的猫,使其与设施/家庭中的其他猫没有任何接触,直到确认该猫没有脱落FeLV。最常见发生的错误是猫检测为阴性,并且不认为猫可能是最近才被感染的,对于阳性检测结果来说为时过早。如果密切使用FeLV诊断方法(图),并且在此期间保持猫隔离,可以避免这种陷阱。在多猫场所中检测猫是否免受FeLV感染在这种情况下,最佳策略取决于目标。理想情况下,多猫设施中不存在FeLV携带者。为了确认达到此目标,必须使用DNAPCR对所有猫进行FeLV前病*检测,以检测仅是FeLV前病*携带者的猫(退行性感染)。由于FeLV暴露前大约周,FeLV前病*PCR检测可以呈阳性(表),因此需将猫与任何潜在的FeLV感染风险隔离~周。或者,目标可能是场所中不活跃的FeLV脱落者,以防止任何未感染FeLV幼猫被感染。可以通过对所有动物(抗原阳性猫为脱落者)进行FeLV抗原血液检测来确认没有FeLV脱落者,或者更具成本效益地,通过使用RT-PCR检测所有猫的唾液样本中的病*RNA确认。对于后一种分析,样品收集非常简单,唾液样品可以汇集起来,由专门实验室进行检测。正如已经讨论过的,建议每次检测所收集的唾液样本不要超过10个(请事先与实验室联系)。RT-PCR还具有一个优点,即在暴露后约1周内就可以检测到感染猫。如果使用抗原检测且不能排除最近的FeLV暴露,则需要在6周后对猫进行重新检测。在此期间,应将检测FeLV阳性的猫保持分开。ABCD可提供有关多猫环境中FeLV管理的更多信息。预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇
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查看完整版本: 猫白血病病毒感染一种实用的诊断方法